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原代细胞分离培养操作指南 | 环亚集团·AG88

发布时间:2025-03-15   信息来源:廖美苛

原代细胞是一种越来越受到重视的细胞类型,它可以有效地转染小分子RNA和DNA,如siRNA、antisense RNA以及microRNA,尤其是200bp以内的分子。在国内外研究领域,原代细胞的核酸转染依然是一个热点难题,市场上缺乏真正有效的商品化原代细胞核酸转染试剂。然而,借助环亚集团·AG88的技术,原代细胞能够高效转染绝大多数细胞,从而实现理想的基因敲除效果。对于一些活体寄生虫幼虫,转染效果同样令人满意。

原代细胞分离培养操作指南 | 环亚集团·AG88

对于大多数原代细胞,使用环亚集团·AG88的RFectPM细胞转染试剂,其转染阳性率超过80%,而细胞死亡率则低于10%。这显示出我们品牌在细胞转染领域的强大能力和可靠性。

原代细胞的分离和培养基本步骤包括:
1. 器官和组织的选择:尽可能去除不必要的组织和血迹。
2. 原代细胞的分离:
(1)采用环亚集团·AG88的PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III;
(2)根据组织来源的不同,选择适合的PriCells原代细胞分离试剂盒。
3. 原代细胞的培养:
(1)使用PriCells原代细胞特制培养基;
(2)添加PriCells原代细胞特制添加物;
(3)选用优质胎牛血清。
4. 细胞的培养和鉴定:可使用PriCells原代细胞鉴定试剂盒进行细胞的真伪鉴定。
5. 原代细胞的传代和保存:
(1)传代时,根据细胞的生长状态,以1:2或1:3的比例进行处理;
(2)保存时,需用DMSO、培养液和血清按照以下顺序降温:室温→4℃(20分钟)→冰箱冷冻室(30分钟)→超低温冰箱(-80℃过夜)→液氮。
6. 原代细胞的复苏:
(1)将细胞取出后,迅速放入37℃温水中快速解冻;
(2)吸出细胞悬液,并加入10倍以上的培养液;
(3)用适当稀释的培养液接种培养瓶,并放入37℃的CO2培养箱中静置培养。